一. 薄層層析法基礎(chǔ)知識:(硅膠板)
薄層層析又叫薄板色譜,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù),屬固-液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾毫克,甚至0.01毫克)的分離,另一方面再制作薄層板時,把吸附層加厚加大,又可用來精致樣品,此法特別適用于發(fā)揮性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
二. 色譜條件:
(1).固定相選擇:
柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相,分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同。
一般用于薄層色譜時,要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(用于柱色譜)和薄層色譜級(用于薄層色譜)。
(2).展開劑選擇:
薄層色譜展開劑的選擇和柱色譜一樣,主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來考慮,展開劑
的極性越大,對化合物的洗脫力也越大。
選擇展開劑時,除參照表列溶劑性來選擇外,更多地采用實驗的方法,在一塊薄層板上進(jìn)行實驗:
①. 若所選展開劑使混合物中所有的組分點都移到了溶劑前沿,此溶劑的極性過強(qiáng)。
②. 若所選展開劑幾乎不能使混合物中的組分點移動,留在了原點上,此溶劑的極性過弱。當(dāng)一種溶劑不能很好地展開各組分時,常選擇用混合溶劑作為展開劑,先用一種極性較小的溶劑為基礎(chǔ)溶劑展開混合物,若展開不好,用極性較大的溶劑與前一溶劑混合,調(diào)整極性,再次試驗,直到選出合適的展開劑組合。合適的混合展開劑常需要多次仔細(xì)選擇才能確定。
(3).相對移動值:從點樣原點開始到展開后的溶劑前沿,是溶劑的移動距離,記為l1,混合物中個組分的移動距離分別記為l1,l2,l3...在不同的展開條件下,各化合物的移動距離不會相同,而在同一條件下,相對于展開劑的移動距離,各化合物有可比較的展
開數(shù)據(jù),稱為相對移動值會比移值:Rf=l1/l0,在相同條件下測得的比移值可以作為化合物的薄層色譜特征值進(jìn)行比較對照
。
薄層層析又叫薄板色譜,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù),屬固-液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾毫克,甚至0.01毫克)的分離,另一方面再制作薄層板時,把吸附層加厚加大,又可用來精致樣品,此法特別適用于發(fā)揮性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
二. 色譜條件:
(1).固定相選擇:
柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相,分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同。
一般用于薄層色譜時,要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(用于柱色譜)和薄層色譜級(用于薄層色譜)。
(2).展開劑選擇:
薄層色譜展開劑的選擇和柱色譜一樣,主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來考慮,展開劑
的極性越大,對化合物的洗脫力也越大。
選擇展開劑時,除參照表列溶劑性來選擇外,更多地采用實驗的方法,在一塊薄層板上進(jìn)行實驗:
①. 若所選展開劑使混合物中所有的組分點都移到了溶劑前沿,此溶劑的極性過強(qiáng)。
②. 若所選展開劑幾乎不能使混合物中的組分點移動,留在了原點上,此溶劑的極性過弱。當(dāng)一種溶劑不能很好地展開各組分時,常選擇用混合溶劑作為展開劑,先用一種極性較小的溶劑為基礎(chǔ)溶劑展開混合物,若展開不好,用極性較大的溶劑與前一溶劑混合,調(diào)整極性,再次試驗,直到選出合適的展開劑組合。合適的混合展開劑常需要多次仔細(xì)選擇才能確定。
(3).相對移動值:從點樣原點開始到展開后的溶劑前沿,是溶劑的移動距離,記為l1,混合物中個組分的移動距離分別記為l1,l2,l3...在不同的展開條件下,各化合物的移動距離不會相同,而在同一條件下,相對于展開劑的移動距離,各化合物有可比較的展
開數(shù)據(jù),稱為相對移動值會比移值:Rf=l1/l0,在相同條件下測得的比移值可以作為化合物的薄層色譜特征值進(jìn)行比較對照
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